Biogradetech：PKH26細胞連接試劑盒

PKH26是一種膜標記探針，結構上帶有一長脂肪族尾巴，能穩定插入細胞膜脂質區域。PKH26最大激發波長為551nm，最大發射波長是567nm，與羅丹明或PE檢測系統兼容。也可能用標準熒光素（Fluorescein）激發濾片，但熒光強度可能會有些降低。PKH26具最長的體內半衰期，超過100天，非常適用于體內細胞示蹤、細胞增殖研究和其他長期實驗。

艾美捷獨家代理的Biogradetech的PKH26細胞連接試劑盒（用于常規細胞膜標記）（PKH26 Cell Linker Kit for General Cell Membrane Labeling， Cat：B-CHK104）是一款基于熒光探針PKH26，用于常規細胞膜標記的檢測試劑盒，適用于體外細胞標記，體外細胞增殖以及長期的體內細胞跟蹤研究等。

試劑盒中包含一管PKH26染料以及一管稀釋液C（Diluent C），稀釋液C是本試劑盒配套提供的一種水溶性溶液，特別設計的一種標記媒介能維持細胞活力，同時大化染料溶解性和標記過程中的染色效率。Diluent C對哺乳動物細胞來說是等滲的，不含去污劑或有機溶劑，也不含生理鹽和緩沖劑。根據細胞類型，染料標記后膜的內在化程度，標記細胞可能呈現不同的狀態，從明亮，到均勻點狀或斑駁狀。然而，PKH26熒光在生理范圍內不依賴于pH，且每個細胞的熒光強度通常不受染料位置的影響。

PKH26主要應用類型包括：

1. 細胞增殖分析

通過測量細胞的熒光強度和分布，可以估算細胞的增殖代次、增殖速率、增殖周期等參數。這種方法可以用于檢測不同條件下細胞的增殖能力，如抗原刺激、藥物干預、基因修飾等。也可以用于識別不同增殖能力的細胞亞群，如干細胞、祖細胞、癌細胞等。

2. 細胞遷移分化跟蹤

通過將標記的細胞移植到體內或體外的目標組織中，可以觀察細胞在活體組織中的遷移軌跡和分化狀態。這種方法可以用于研究干細胞治療、組織再生、腫瘤轉移等過程。

3. 細胞間相互作用檢測

通過觀察不同熒光標記的細胞之間的接觸、融合、轉移等現象，可以研究細胞間的信號傳遞、功能協調、物質交換等機制。這種方法可以用于研究免疫反應、血小板功能、病毒感染、納米顆粒攝取等過程。

【染色流程】：

【注意事項】：

1）通過分配脂質染料進入細胞膜來進行標記。標記強度是染料濃度和細胞濃度共同作用的一種功能，且不會飽和。因此，用來標記的染料濃度需要有限，過度標記細胞會引起細胞膜完整性喪失和降低的細胞復原能力。

2）以下步驟適用于體外或離體標記干細胞、淋巴細胞、單個核細胞、內皮細胞、神經元或任何需要將染料插入細胞膜脂質區的其他細胞類型。而體內標記、血小板標記，或在含非吞噬細胞的群體內選擇性標記吞噬細胞，需對步驟做適當修改。

3）需在單克隆抗體染色前進行常規細胞膜染色。4℃單克隆抗體染色過程中膜染料仍能維持穩定。然而，如果單抗標記后再室溫下進行常規細胞膜染色，極有可能引起單抗的“蓋帽”發生。

4）以下步驟中用到的細胞和染料濃度是推薦用的起始濃度，廣譜適用于各種細胞類型。用戶需根據自身細胞類型和實驗目的確定加的染料和細胞濃度，通過對染色后細胞活力（比如典化丙啶排斥），熒光強度，染色均勻性和對待研究細胞功能無影響等方面來綜合評估。

5）PKH26染色過程中需避免疊氮化物或代謝毒物的存在。

6）雖然粘附在固相基質上的貼壁細胞可能被標記，使用單細胞懸浮液能得到更勻質的染色結果。染色前使用蛋白消化酶比如胰酶/EDTA處理貼壁或結合細胞制備成分散的單細胞懸液能得到好的染色結果。

相關產品推薦：

Biogradetech生命科學和醫藥研發行業關鍵原料與試劑的領先供應商：Biogradetech成立于2015年，總部位于美國加利福尼亞州，早期以產品技術研發服務起家，逐步發展了廣泛的產品線，并將其商業化銷售，包括蛋白質、抗體、酶、培養基、試劑盒和儀器。適用于細胞生物學、蛋白質組學、分子生物學、免疫學、微生物學、診斷學、生物化學、神經科學、血液分析和高通量藥物篩選等領域。