基因克隆技術是分子生物學的核心技術,分子克隆指的是在體外將核酸分子插入病毒、質?;蚱渌d體分子,構成遺傳物質的新組合,使之進入宿主細胞內并獲得持續穩定增殖能力和表達?;蚩寺〖夹g的發展經歷3個階段:
第一階段為經典的T4 DNA連接酶介導的TA克隆及粘性末端克??;
第二階段為基于DNA修飾酶的LIC系列克??;
第三階段為基于DNA重組酶的Gateway克隆及一步法克隆。
1、即用型表達克隆,構建表達載體所用的酶以及中間載體
提供140,000個預制即用型Nextday-ORF 克隆。無需再等上數日/數周即可馬上進行基因表達或蛋白表達實驗。每一個Nextday-ORF?克隆均經過序列驗證,次日寄送,且多種病毒、非病毒類載體可選。
詳情查看:1、一步到位or從頭開始,GeneCopoeia基因克隆滿足你所有想象 |
2、轉染試劑
細胞轉染是指將外源基因如DNA,RNA等導入細胞內的一種技術。根據哺乳動物細胞蛋白表達流程,細胞培養完成后需進行細胞轉染,根據不同的實驗目的可選擇不同的轉染方法。目前,常用的細胞轉染方法主要分為三類途徑:物理介導(電穿孔法,基因槍法、顯微注射法)、化學介導(脂質體轉染法、磷酸鈣共沉淀法、陽離子聚合物介導法)、生物介導(病毒介導轉染、原生質體轉染)。
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3、構建表達載體
Gateway克隆技術作為一種可以快速、高效將DNA序列轉移到載體上的克隆方法,Gateway技術依賴于下面描述的兩個反應:BP反應和LR反應,通過BP反應獲得入門克隆(有時候我們也說中間克隆),再通過LR反應將目的DNA以正確的方向連接到各種目的載體上,形成不同的表達載體。向大家介紹BP反應-構建入門載體和LR反應-構建表達載體:
詳情查看:1、Gateway克隆技術高深莫測? |
4、熒光素酶
熒光素酶(luciferase)是自然界中能夠產生生物熒光的酶的總稱。熒光素和熒光素酶這一生物發光體系,可以極其靈敏、高效地檢測基因的表達,是檢測轉錄因子與目的基因啟動子區DNA相互作用的一種檢測方法。
其中要介紹有:1、螢火蟲熒光素酶(Firefly luciferase);2、海腎熒光素酶(Renilla luciferase);3、Gaussia 分泌型熒光素酶;4、分泌型堿性磷酸酶(secreted alkaline phos-phatase,SEAP)
詳情查看:1、神奇的熒光素酶(一),知否知否 |
詳情查看:2、神奇的分泌型熒光素酶(二),知否知否 |
產品推介:
1、構建表達載體所用的酶以及中間載體
貨號 | 載體名稱 | 規格 | 描述 |
RCBM-1001-020 | EZRecombinase LR Mix | 20次反應 | 催化attL x attR重組反應,高效率酶,與Gateway 克隆技術完全兼容 |
RCBM-1001-100 | 100 次反應 | ||
RCBM-1002-020 | EZRecombinase BP Mix | 20次反應 | 催化attB x attP重組反應,高效率酶,與Gateway?克隆技術完全兼容 |
RCBM-1002-100 | 100 次反應 |
貨號 | 載體名稱 | 規格 | 類型 |
EZ001 | pEZ-Lv199 | 10ug | 慢病毒表達載體 |
EZ003 | pEZ-Lv233 | 10ug | |
EZ004 | pEZ-Lv195 | 10ug | |
EZ006 | pEZ-Lv201 | 10ug | |
EZ007 | pEZ-M02 | 10ug | 哺乳動物細胞表達載體 |
EZ008 | pEZ-M13 | 10ug | |
EZ009 | pEZ-M67 | 10ug | |
EZ010 | pEZ-M68 | 10ug | |
EZ011 | pEZ-M98 | 10ug | |
EZ012 | pEZ-SH01 | 10ug | Human Safe Harbor載體 |
EZ013 | pEZ-SH02 | 10ug | Mouse Safe Harbor載體 |
EZ014 | pEZ-B01 | 10ug | 大腸桿菌表達載體 |
EZ015 | pEZ-B02 | 10ug | |
EZ016 | pEZ-Lv235 | 10ug | 慢病毒表達載體 |
EZ017 | pEZ-Lv236 | 10ug | |
EZ018 | pEZ-Lv237 | 10ug | |
EZ019 | pEZ-Lv238 | 10ug | |
EZ021 | pEZ-P002 | 10ug | 植物表達載體 |
EZ023 | pEZ-P004 | 10ug | |
EZ026 | pEZ-P007 | 10ug | |
EZ027 | pEZ-P008 | 10ug | |
EZ029 | pEZ-P010 | 10ug | |
EZ030 | pEZ-P011 | 10ug | |
EZ031 | pEZ-P012 | 10ug | |
EZ032 | pEZ-P013 | 10ug | |
EZ033 | pEZ-M06 | 10ug | 哺乳動物細胞表達載體 |
EZ034 | pEZ-M09 | 10ug | |
EZ035 | pEZ-M12 | 10ug | |
EG001 | pShuttle-D01 | 10ug | 穿梭載體 |
EG002 | pShuttle-D02 | 10ug |
2、轉染試劑
貨號 | 名稱 | 適用性 |
EndoFectin? Max轉染試劑 (1 mL) | 廣泛適用于多種細胞 | |
EndoFectin? Max轉染試劑 (3 mL) | ||
CRISPR-Fectin? 轉染試劑 (1 mL) | 優化的CRISPR-Cas9核蛋白專用的轉染試劑??膳cGeneHero? Cas9蛋白配合使用 | |
EndoFectin? Expi293 轉染試劑 (1 mL) | 專注轉染懸浮細胞293F,轉染效率極高 | |
EndoFectin? Expi293 增強轉染試劑盒 (1L 轉染用量) | ||
EndoFectin? Expi293 增強轉染試劑盒 (10L 轉染用量) | ||
EndoFectin? HepG2 轉染試劑 (1 mL) | 為常用細胞系HepG2進行優化設計 | |
EndoFectin? HepG2 轉染試劑 (3 mL) | ||
EndoFectin? Lenti轉染試劑 (1 ml) | 轉染293T細胞,可收獲更高滴度的慢病毒 | |
EndoFectin? Lenti轉染試劑 (3 ml)) |
3、BP反應-構建入門載體和LR反應-構建表達載體
貨號 | 名稱 | 說明 |
RCBM-1002-020 | EZRecombinase? BP Cloning Kit (20 rxn) | Catalyzes attB x attP cloning(催化BP反應) |
RCBM-1002-100 | EZRecombinase? BP Cloning Kit (100 rxn) | Catalyzes attB x attP cloning(催化BP反應) |
RCBM-1001-020 | EZRecombinase? LR Cloning Kit (20 rxn) | Catalyzes attL x attR cloning(催化LR反應) |
RCBM-1001-100 | EZRecombinase? LR Cloning Kit (100 rxn) | Catalyzes attL x attR cloning(催化LR反應) |
4、熒光素酶
貨號 | 產品名稱 | 產品特性 | 熒光素酶 | 規格 |
LF001 | Luc-Pair? Duo-Luciferase Assay Kit 2.0 Hot ! | 穩定型 | 螢火蟲(Fluc) 海腎(Rluc) | 100rxns |
LF002 | 300rxns | |||
LF003 | 1000rxns | |||
LF004 | Luc-Pair? Duo-Luciferase HS Assay Kit Hot ! | 高靈敏型 | 螢火蟲(Fluc) 海腎(Rluc) | 100rxns |
LF005 | 300rxns | |||
LF006 | 1000rxns | |||
LF007 | Luc-Pair? Firefly Luciferase HS Assay Kits | 高靈敏型 | 螢火蟲(Fluc) | 100rxns |
LF008 | 300rxns | |||
LF009 | 1000rxns | |||
LF010 | Luc-Pair? Renilla Luciferase HS Assay Kit | 高靈敏型 | 海腎(Rluc) | 100rxns |
LF011 | 300rxns | |||
LF012 | 1000rxns | |||
LF013 | Luc-Pair? Duo-Luciferase HT Assay Kit | 穩定型, 無需預先裂解細胞,適用高通量分析 | 螢火蟲(Fluc) 海腎(Rluc) | 10mL |
LF014 | 30mL | |||
LF015 | 100mL | |||
LF016 | Luc-Pair ? Firefly Luciferase HT Assay Kit | 穩定型, 無需預先裂解細胞,適用高通量分析 | 螢火蟲(Fluc) | 10mL |
LF017 | 30mL | |||
LF018 | 100mL | |||
LF019 | Luc-Pair? Renilla Luciferase HT Assay Kit | 穩定型, 無需預先裂解細胞,適用高通量分析 | 海腎(Rluc) | 10mL |
LF020 | 30mL | |||
LF021 | 100mL |
熒光素酶報告基因載體:
貨號 | 產品 | 啟動子 | 報告基因 | 示蹤基因 | 篩選標記 | 抗性 | 研究 |
ZX001 | pEZX-FR01(10?g) | N/A* | Firefly (hLuc) | Renilla (Rluc) | Puromycin | Kanamycin | 常規啟動子等研究 |
ZX002 | pEZX-FR02(10?g) | SV40 | Firefly (hLuc) | Renilla (Rluc) | N/A* | Ampicillin | UTR靶標等研究 |
ZX003 | pEZX-FR03(10?g) | miniCMV | Firefly( hLuc) | Renilla (RLuc) | Puromycin | Kanamycin | 轉錄因子結合位點等研究 |
貨號 | 名稱 | 規格 | 產品特性 |
LF031 | Secrete-PairTM Dual Luminescence Assay Kit | 100rxns | 無需破碎細胞,吸取上清;檢測Gluc 和SEAP酶活性 |
LF032 | 300rxns |
分泌型單熒光素酶檢測試劑盒
貨號 | 名稱 | 規格 | 產品特性 |
LF061 | Secrete-PairTM Gaussia Luciferase Assay Kit | 100rxns | 無需破碎細胞,吸取上清;檢測Gluc的酶活性 |
LF062 | 1000rxns |
熒光素酶報告基因載體:
貨號 | 產品 | 描述 | 規格 |
ZX101 | pEZX-GN01 | pEZX-GN01 包含Gluc和SEAP的報告載體 | 10?g |
ZX102 | pEZX-GN03 | pEZX-GN03 包含Gluc和SEAP的報告載體 | 10?g |
ZX103 | pEZX-GA01 | pEZX-GA01 包含Gluc和SEAP的報告載體 | 10?g |
ZX104 | pEZX-GA02 | pEZX-GA02 包含Gluc和SEAP的報告載體 | 10?g |
ZX105 | pEZX-GA03 | pEZX-GA03 包含Gluc和SEAP的報告載體 | 10?g |
ZX106 | pEZX-LvGN01 | pEZX-LvGN01 包含Gluc和SEAP的報告載體 (lentiviral) | 10?g |
ZX107 | pEZX-LvGA01 | pEZX-LvGA01 包含Gluc和SEAP的報告載體 (lentiviral) | 10?g |
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